ウイルスDNA/RNA抽出キット
このキットは、鼻咽頭スワブ、環境スワブ、細胞培養上清、組織ホモジネート上清などのサンプルから高純度ウイルス DNA/RNA を迅速に抽出するのに適しています。このキットはシリカ膜精製技術に基づいており、フェノール/クロロホルム有機溶媒の使用や時間のかかるアルコール沈殿を必要とせず、高品質のウイルス DNA/RNA を抽出します。得られた核酸には不純物が含まれておらず、逆転写、PCR、RT-PCR、リアルタイム PCR、次世代シーケンシング (NGS)、ノーザン ブロットなどの下流実験ですぐに使用できます。
保管条件
15~25℃で保存し、室温で輸送してください
コンポーネント
コンポーネント | 100RXNS |
バッファVL | 50ml |
バッファRW | 120ml |
RNaseフリーのddH2O | 6ml |
FastPure RNA カラム | 100 |
コレクションチューブ(2ml) | 100 |
RNaseフリーコレクションチューブ(1.5ml) | 100 |
バッファVL:溶解と結合のための環境を提供します。
バッファRW:残留タンパク質やその他の不純物を除去します。
RNase フリーの ddH2O:スピンカラム内のメンブレンから DNA/RNA を溶出します。
FastPure RNA カラム:DNA/RNAを特異的に吸着します。
コレクションチューブ 2ml:濾液を集めます。
RNase フリー コレクション チューブ 1.5 ml:DNA/RNAを収集します。
アプリケーション
鼻咽頭スワブ、環境スワブ、細胞培養上清、および組織ホモジネート上清。
自作メーターイアル
RNase フリーのピペット チップ、1.5 ml RNase フリーの遠心管、遠心分離機、ボルテックス ミキサー、およびピペット。
実験プロセス
以下のすべての手順をバイオセーフティキャビネット内で実行します。
1. サンプル 200 μl を RNase フリーの遠心管に加え(サンプルが不十分な場合は PBS または 0.9% NaCl で補ってください)、Buffer VL 500 μl を加え、15 ~ 30 秒間ボルテックスしてよく混合し、遠心分離します。混合物をチューブの底に集めます。
2. FastPure RNA カラムをコレクションチューブ 2 ml に入れます。ステップ 1 の混合物を FastPure RNA Columns に移し、12,000 rpm (13,400 × g) で 1 分間遠心分離し、濾液を捨てます。
3. 600 μl の Buffer RW を FastPure RNA Columns に加え、12,000 rpm (13,400 × g) で 30 秒間遠心分離し、濾液を廃棄します。
4. ステップ 3 を繰り返します。
5. 空のカラムを 12,000 rpm (13,400 × g) で 2 分間遠心分離します。
6. FastPure RNA カラムを新しい RNase-free Collection Tubes 1.5 ml (キットに付属) に慎重に移し、カラムに触れないように RNase-free ddH2O 30 ~ 50 μl をメンブレンの中心に加えます。室温で 1 分間放置し、12,000 rpm (13,400 × g) で 1 分間遠心分離します。
7. FastPure RNA カラムを廃棄します。DNA/RNA はその後のアッセイに直接使用することも、短期間であれば -30 ~ -15℃、長期間であれば -85 ~ -65℃で保存することもできます。
ノート
研究用途のみ。診断手順には使用できません。
1. サンプルを事前に室温に平衡化します。
2. ウイルスは感染力が非常に強い。実験の前に、必要な安全上の注意がすべて講じられていることを確認してください。
3. 抽出されたウイルス DNA/RNA の劣化や収量の減少につながる可能性があるため、サンプルの凍結と解凍を繰り返すことは避けてください。
4. 自己準備の機器には、RNase フリーのピペット チップ、1.5 ml RNase フリーの遠心分離管、遠心分離機、ボルテックス ミキサー、およびピペットが含まれます。
5. キットを使用するときは、RNase 汚染のリスクを最小限に抑えるために、白衣、使い捨てラテックス手袋、および使い捨てマスクを着用し、RNase フリーの消耗品を使用してください。
6. 特に指定がない限り、すべての手順を室温で実行します。
仕組みとワークフロー