RNase阻害剤（グリセロールフリー）
マウス RNase インヒビターは、大腸菌から発現および精製された組換えマウス RNase インヒビターです。非共有結合によって RNase A、B、または C に 1:1 の比率で結合し、それによって 3 つの酵素の活性を阻害し、RNA を分解から保護します。ただし、RNase 1、RNase T1、S1 Nuclease、RNase H、Aspergillus 由来の RNase に対しては効果がありません。マウス RNase 阻害剤は、RT-PCR、RT-qPCR、IVT mRNA によってテストされ、さまざまな市販の逆転写酵素、DNA ポリメラーゼ、RNA ポリメラーゼと互換性がありました。
ヒト RNase 阻害剤と比較して、マウス RNase 阻害剤には、阻害剤の不活化を引き起こす酸化に非常に敏感な 2 つのシステインが含まれていません。そのため、低濃度の DTT (1 mM 未満) でも安定します。この特徴により、高濃度の DTT が反応に悪影響を与える反応 (リアルタイム RT-PCR など) での使用に適しています。
Aアプリケーション
この製品は、RNA 分解を回避するために RNase 干渉が可能な次のようなあらゆる実験で広く使用できます。
1.ファーストストランドcDNA合成、RT-PCR、RT-qPCRなど;
2.インビトロ転写/翻訳（例えば、インビトロウイルス複製）における分解からRNAを保護する。
3.RNAの単離および精製中のRNase活性の阻害。
保管条件
-25～-15℃で保存してください。
凍結融解サイクル ≤ 5 回。
有効期限は 1 年間です。
単位の定義
1 単位は、5 ng の RNase A の活性を 50% 阻害するのに必要な RNase インヒビターの量として定義されます。
分子量
RNase 阻害剤 (グリセロールフリー) は 50 kDa のタンパク質です。
品質管理
エキソヌクレアーゼ 活動：
４０Ｕの酵素を１μｇのλ－Ｈｉｎｄ ＩＩＩ消化ＤＮＡと３７℃で１６時間インキュベートした結果、ゲル電気泳動で測定したところＤＮＡの分解は検出されなかった。
エンドヌクレアーゼ活性:
40Uの酵素を1μgのλDNAと37℃で16時間インキュベートした結果、ゲル電気泳動で測定したところDNAの分解は検出されませんでした。
ニッキング 活動：
４０Ｕの酵素を１μｇのｐＢＲ３２２と３７℃で１６時間インキュベートしても、ゲル電気泳動で測定したところＤＮＡの分解は検出されなかった。
RNase 活動:
40 U の酵素を 1.6 μg MS2 RNA と 37℃ で 4 時間インキュベートしても、ゲル電気泳動で測定したところ、RNA の分解は検出されませんでした。
E.大腸菌DNA:
40 U の酵素が TaqMan qPCR によって検出されます。大腸菌 DNA は 0.1pg/40U 以下です。
N大手s
1.酵素の失活を防ぐため、激しく振ったりかき混ぜたりしないでください。
2.RNase阻害剤は25℃～55℃の温度範囲で活性を示し、65℃以上で失活します。
3.RNase H、RNase 1、RNase T1の活性は阻害されません。
4.RNase 活性を阻害する pH 範囲は広く (pH 5 ～ 9 で活性)、pH 7 ～ 8 で最大活性を示します。
