アルカリ性ホスファターゼ (ALP)

アルカリホスファターゼは、TAB5 遺伝子を持つ組換え大腸菌株に由来します。この酵素は、DNA および RNA ホスホモノエステルの 5' および 3' 末端の脱リン酸化を触媒します。また、リボースだけでなくデオキシリボヌクレオシド三リン酸 (NTP および dNTP) も加水分解します。TAB5 アルカリホスファターゼは、5' 突出端、5' 凹部および平滑末端に作用します。ホスファターゼは、DNA または RNA のリン酸化末端を除去するためのクローニングやプローブ末端標識など、多くの分子生物学の用途に使用できます。クローニング実験では、脱リン酸化により線状プラスミド DNA のセルフライゲーションが防止されます。また、PCR 反応で取り込まれなかった dNTP を分解して、DNA 配列決定用のテンプレートを調製することもできます。酵素は70℃で5分間加熱することで完全かつ不可逆的に不活化されるため、ライゲーションや末端標識前のホスファターゼの除去は不要です。