DNase I (RNase フリー) (2u/ul)
カタログ番号: HC4007B
DNase I は、一本鎖または二本鎖 DNA を消化できるエンドヌクレアーゼです。ホスホジエステル結合を加水分解して、5'-リン酸基と 3'-OH 基を含むモノデオキシヌクレオチドおよびオリゴデオキシヌクレオチドを生成します。DNase I の最適作用 pH 範囲は 7 ～ 8 です。DNase Iの活性はCaに依存します2+COなどの二価金属イオンによって活性化されます2、ん2+、亜鉛2+、など Mg の存在下2+, DNase I は二本鎖 DNA の任意の部位をランダムに切断できます。Mnの存在下で2+, DNase I は同じ部位で二本鎖 DNA を切断し、平滑末端または 1 ～ 2 ヌクレオチドが突き出た粘着末端を形成します。さまざまな RNA サンプルの処理に使用できます。
コンポーネント
| 名前 | 1KU | 5KU |
| 組換えDNaseI (RNaseフリー) | 500μL | 5×500μL |
| DNase I 反応バッファー (10×) | 1mL | 1mL×5本 |
保管条件
本製品は-25～-15℃で2年間保存してください。繰り返しの凍結融解は避けてください。
説明書
参考のためにのみ、RNA サンプルからの DNA の除去に適用されます。
1. RNase フリーの遠沈管とピペットチップを使用して、以下の反応系を準備してください。
| コンポーネント | 体積(μL) |
| DNase I 反応バッファー (10×) | 1 |
| 組換えDNasel（RNaseフリー） | 1 |
| RNA | X |
| RNase フリー ddH2O | 10まで |
2. 反応条件は次のとおりです。37℃、15 ～ 30 分後、最終濃度 2.5 mM EDTA 溶液を加えてよく混合し、その後 65℃ で 10 分間反応させます。処理されたテンプレートは、その後の RT-PCR または RT-qPCR 実験などに使用できます。
ノート
1. DNase I は物理的変性に対して敏感です。混合するときは、試験管を静かに逆にし、よく振ってください。激しく振らないでください。
2. 酵素の使用時はアイスボックスまたは氷浴上で保管し、使用後は直ちに-20℃で保管してください。
3. この製品は研究専用です。
4. 安全のため、白衣と使い捨て手袋を着用して作業してください。
