ルナーゼA
リボヌクレアーゼ A(RNaseA) は、分子量約 13.7 kDa の 4 つのジスルフィド結合を含む一本鎖ポリペプチドです。RNase A は、一本鎖 RNA の C および U 残基を特異的に分解するエンドリボヌクレアーゼです。具体的には、切断はヌクレオチドの 5'-リボースと隣接するピリミジン ヌクレオチドの 3'-リボースのリン酸基によって形成されるホスホジエステル結合を認識し、2,3'-環状リン酸が対応する 3 つのリン酸に加水分解されます。 'ヌクレオシドリン酸（例えば、pG-pG-pC-pA-pGはRNase Aによって切断され、pG-pG-pCpおよびA-PGが生成される）。RNase A は、一本鎖 RNA の切断において最も活性があります。推奨使用濃度は 1 ～ 100 μ G/mL で、さまざまな反応系に適合します。低塩濃度 (0 ～ 100 mM NaCl) を使用して、一本鎖 RNA、二本鎖 RNA、および RNA-DNA ハイブリダイゼーションによって形成された RNA 鎖を切断できます。
ただし、高い塩濃度 (≥0.3 M) では、RNase A は一本鎖 RNA のみを特異的に切断します。
RNase A は、プラスミド DNA またはゲノム DNA の調製中に RNA を除去するために最も一般的に使用されます。調製プロセス中に DNase が活性であるかどうかは、反応に容易に影響を与える可能性があります。ウォーターバスで煮沸するという従来の方法を使用して、DNase 活性を不活性化できます。本品にはDNase、プロテアーゼが含まれていないため、使用前の加熱処理が不要です。さらに、本製品はRNaseプロテクション解析やRNA配列解析などの分子生物学実験にも使用できます。
保管条件
-25℃～-15℃で2年間保存してください。
仕様
| 外観 | 粉 |
| 量 | 100mg/1g |
| 製品の種類 | RNase A |
説明書
これは、RNase A 保存溶液を調製するための一般的な方法の 1 つです。ご用意することも可能です研究室での伝統的な方法や参考文献（例えば、10 mM Tris-HCl、pH 7.5 または Tris-NaCl 溶液に直接溶解）
1. 10 mM 酢酸ナトリウム (pH 5.2) を使用して、10 mg/mL の RNase A 保存溶液を調製します。
2. 100℃で15分間加熱します。
3. 室温まで冷却し、1/10 量の 1 M Tris-HCl (pH 7.4) を加え、pH 7.4 に調整します (pH 7.4)。たとえば、500 mL の 10 mg/mL RNase 保存溶液 (1 M Tris-HCl、pH7.4) を加えます。
4. 冷凍保存用に-20℃で小包装されており、最長2年間安定です。
[ノート]：
RNaseA 溶液を中性条件下で沸騰させると、RNase 沈殿が形成されます。より低い pH で煮沸すると、沈殿が観察されますが、これはタンパク質不純物の存在が原因である可能性があります。煮沸後に沈殿物が見つかった場合は、高速遠心分離（13000rpm）により不純物を除去し、小分けして冷凍保存できます。
ノート
健康と安全を確保するために、白衣や手袋などの必要な個人用保護具（PPE）を着用してください。
