Robustart Taq DNA ポリメラーゼ

Robustart Taq DNA ポリメラーゼは、ホットスタート DNA ポリメラーゼです。この製品は、PCR システムの準備および増幅のプロセスにおけるプライマーの非特異的アニーリングまたはプライマーの凝集によって引き起こされる非特異的反応をより効果的に抑制することができるだけではありません。そのため、特異性に優れ、低濃度の鋳型の増幅に効果的であり、マルチプレックスPCR増幅反応に適しています。また、本製品は応用性が非常に高く、さまざまな種類のPCR反応において安定した増幅結果が得られます。

コンポーネント

1.5 U/μL Robustart Taq DNA ポリメラーゼ

2.10 × PCR バッファー II (Mg²+ フリー) (オプション)

3.25 mM MgCl₂(オプション)

* 10 × PCR Buffer II (Mg²+ フリー) には dNTP と Mg²+ が含まれていません。dNTP と MgCl を追加してください。₂反応系を準備するとき。

推奨アプリケーション

1.高速増幅。

2.多重増幅。

3.血液、綿棒、その他のサンプルの直接増幅。

4.呼吸器疾患の検出。

保存条件

長期保管の場合は -20°C で、使用前によく混合する必要があり、頻繁な凍結融解は避けてください。

*冷蔵後に沈殿が発生する場合は正常です。混合して使用する前に室温に平衡化することをお勧めします。

単位の定義

1活性単位（U）は、活性化サケ精子DNAを鋳型/プライマーとして使用し、74℃で30分間、10 nmolのデオキシリボヌクレオチドを酸不溶性物質に取り込む酵素の量として定義されます。

品質管理

1.SDS-PAGE 電気泳動純度は 98% 以上。

2.増幅感度、バッチ間の制御、安定性。

3.外因性ヌクレアーゼ活性なし、外因性エンドヌクレアーゼまたはエキソヌクレアーゼの汚染なし

説明書

反応のセットアップ

ノート：

1) a.バッファーには dNTP と Mg²+ が含まれていません。dNTP と MgCl を追加してください。₂反応系を準備するとき。

2) b.qPCR/qRT-PCRに使用する場合は、反応系に蛍光プローブを添加する必要があります。通常、最終プライマー濃度 0.2 μM で良好な結果が得られます。反応性能が悪い場合は、プライマー濃度を0.2～1μMの範囲で調整できます。プローブ濃度は通常 0.1 ～ 0.3 μM の範囲で最適化されます。濃度勾配実験を実行して、プライマーとプローブの最適な組み合わせを見つけることができます。

サーマルサイクリングプロトコル

ノート

1.高速 DNA ポリメラーゼの増幅速度は 1 kb/10 秒以上である必要があります。PCR 機器ごとに温度上昇率、下降率、温度制御モード、熱伝導効率が大きく異なるため、特定の高速 PCR 機器に最適な反応条件を最適化することをお勧めします。

2.このシステムは適応性が高く、特異性と感度が高くなります。

3.高感度 PCR 検出試薬としての使用に適しており、マルチプレックス PCR 増幅反応に使用できます。

4.5'→3'ポリメラーゼ活性、5'→3'エキソヌクレアーゼ活性。3'→5'エキソヌクレアーゼ活性なし。校正機能はありません。

5.PCRやRT-PCRの定性・定量検査に適しています。

6.PCR 産物の 3' 末端は A で、T ベクターに直接クローニングできます。

7.3 ステップの方法は、アニーリング温度が低いプライマー、または 200 bp を超えるフラグメントの増幅に推奨されます。