ウルトラヌクレアーゼ
UltraNuclease は Serratia marcescens 由来の遺伝子組み換えエンドヌクレアーゼであり、広範囲の条件下で DNA または RNA を二本鎖または一本鎖、直鎖または環状に分解し、核酸を 3 ～ 5 塩基長の 5'-一リン酸オリゴヌクレオチドに完全に分解することができます。 。遺伝子工学的改変後、生成物は大腸菌（E. coli）で発酵、発現、精製され、これにより細胞上清および細胞溶解物の科学的研究の粘度が低下するだけでなく、タンパク質の精製効率と機能研究も向上します。また、遺伝子治療、ウイルス精製、ワクチン製造、タンパク質および多糖類の製薬産業において宿主残基核酸除去試薬として使用することもできます。
製品の特徴
| CAS番号 | 9025-65-4 |
| EC番号 | |
| 分子量 | 30kDa |
| 等電点 | 6.85 |
| タンパク質の純度 | ≥99%（SDS-PAGE & SEC-HPLC） |
| 特定の活動 | ≧1。1×106U/mg |
| 最適温度 | 37℃ |
| 最適なpH | 8.0 |
| プロテアーゼ活性 | ネガティブ |
| バイオバーデン | ＜10CFU/100,000U |
| 残留宿主細胞タンパク質 | ≤10ppm |
| ヘヴィメタル | ≤10ppm |
| 細菌エンドトキシン | ＜0.25EU/1000U |
| ストレージバッファ | 20mM トリス-HCl、pH 8.0、2mM MgCl2、20mM NaCl、50%グリセロール |
保管条件
≤0°C 輸送；-25~-15°C 保管、2 年間有効（凍結融解は避けてください）。
単位の定義
37℃、pH8.0で30分以内に△A260の吸収値を1.0変化させるのに使用した酵素量（37μgのサケ精子DNAをオリゴヌクレオチドに切断して消化した量に相当）を活性単位（U）と定義した。
品質管理
残留宿主細胞タンパク質: ELISAキット
•プロテアーゼ 残留物: 250KU/mL UltraNuclease が基質と 60 分間反応しましたが、活性は検出されませんでした。
•細菌エンドトキシン: LAL-Test、中華人民共和国薬局方第 4 巻 (2020 年版) ゲル限界試験法。一般規則 (1143)。
•バイオバーデン: 中華人民共和国薬局方 第 4 巻 (2020 年版) - 一般
無菌試験に関する規則 (1101)、中国国家規格、GB 4789.2-2016。
•ヘヴィメタル：ICP-AES、HJ776-2015。
手術
UltraNuclease 活性は、SDS 濃度が 0.1% または EDTA を超えると顕著に阻害されました。
濃度は 1 mM 以上でした。界面活性剤 Triton X-100、Tween 20、および Tween 80 はヌクレアーゼに影響を与えませんでした。
濃度が1.5%未満の場合の特性。
| 手術 | 最適な動作 | 有効な操作 |
| 温度 | 37℃ | 0～45℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0～11.0 |
| Mg2+ | 1-2mM | 1～15mM |
| DTT | 0～100mM | >100mM |
| 2-メルカプトエタノール | 0～100mM | >100mM |
| 一価金属イオン （Na+、K+など） | 0-20mM | 0-200mM |
| PO43- | 0～10mM | 0～100mM |
用法・用量
• ワクチン製品から外因性核酸を除去し、残留核酸毒性のリスクを軽減し、製品の安全性を向上させます。
• 核酸によって引き起こされる供給液の粘度を低下させ、処理時間を短縮し、タンパク質の収量を増加します。
• 粒子（ウイルス、封入体など）を包み込んでいる核酸を除去します。
粒子の放出と精製まで。
| 実験型 | タンパク質の生産 | ウイルス、ワクチン | 細胞薬 |
| 細胞数 | セル湿重量1g (10mlの緩衝液で再懸濁) | 1L発酵 上澄み液 | 1L培養 |
| 最小投与量 | 250U | 100U | 100U |
| 推奨用量 | 2500U | 25000U | 5000U |
• ヌクレアーゼ処理により、カラムクロマトグラフィー、電気泳動、ブロッティング分析におけるサンプルの分離能と回収率が向上します。
• 遺伝子治療では、精製されたアデノ随伴ウイルスを得るために核酸が除去されます。
