ウルトラヌクレアーゼGMPグレード
カタログ番号: HC2016A
UltraNuclease GMP グレードは、遺伝子操作により大腸菌 (E.coli) 内で発現および精製され、GMP 環境下で調製されます。科学研究における細胞上清と細胞溶解物の粘度を低下させ、タンパク質の精製効率を高め、タンパク質の機能研究を強化します。この製品は、宿主の核酸残基を pg グレードに低減することもでき、ウイルス精製、ワクチン製造、タンパク質/多糖類医薬品製造などの用途における生物学的製品の性能と安全性を向上させます。さらに、この製品は細胞治療やワクチン開発におけるヒト末梢血単核球 (PBMC) の凝集の防止にも応用できます。
UltraNuclease は滅菌試薬の形で提供され、緩衝液 (20 mM Tris-HCL pH 8.0、2 mM MgCl、20 mM NaCl、50% グリセリン) で溶出され、無色透明の液体の外観を呈します。この製品はGMPプロセス要件に従って製造され、液体の形態で提供されます。
コンポーネント
UltraNuclease GMP グレード (250 U/μL)
保管条件
ドライアイスを同封して出荷し、-25℃〜-15℃で2年間保存可能です。
開封後4℃で1週間以上保管した場合は濾過をお勧めします。微生物汚染を防ぐ製品です。
仕様
| 式ホスト | UltraNuclease 遺伝子を持つ組換え大腸菌 |
| 分子量 | 26.5 kDa |
| 誘電点 | 6.85 |
| 純度 | ≥99% (SDS-PAGE) |
| ストレージバッファ | 20mM トリス-HCL pH 8.0、2mM MgCl、20mM NaCl、50% グリセリン |
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単位の定義 | 1 活性単位 (U) の定義は、2.625mL中で30分間にΔA260の吸収値を1.0変化させる反応系37℃、pH8.0（完全分解相当）37μgのサケ精子DNAをオリゴヌクレオチドに変換。 |
説明書
1. サンプル コレクション
付着細胞: 培地を除去し、細胞を PBS で洗浄し、上清を除去します。
懸濁細胞: 遠心分離により細胞を収集し、PBS で細胞を洗浄し、6,000 で遠心分離します。rpm で 10 分間回転させ、ペレットを回収します。
大腸菌: 遠心分離により細菌を収集し、PBS で 1 回洗浄し、8,000 で遠心分離します。rpm で 5 分間回転させ、ペレットを回収します。
2. サンプル処理
収集した細胞ペレットを質量(g)と体積(mL)1:(10-20)の比率で溶解バッファーで処理するか、氷上または室温で機械的または化学的方法により処理します(細胞ペレット1gには約
109 セル）。
3. 酵素処理
反応系に 1 ～ 5 mM MgCl を添加し、pH を 8 ～ 9 に調整します。
細胞ペレット1gを消化するのにUltraNucleaseを250ユニットの割合で加え、37℃で30分以上インキュベートします。「推奨反応時間」フォームを参照して選択してください。治療期間。
4. 上清 コレクション
12,000 rpm で 30 分間遠心分離し、上清を回収します。
注: 溶液が酸性またはアルカリ性である場合、または高濃度の塩、洗剤、または変性剤を使用する場合は、それに応じて酵素の投与量を増やすか、治療時間を延長してください。
推奨反応条件オン
| パラメータ | 最適な状態 | 効果的な条件 |
| Mg²+濃度 | 1～5mM | 1～10mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| 温度 | 37℃ | 0～42℃ |
| DTT濃度 | 0～100mM | >0mM |
| メルカプトエタノール濃度 | 0～100mM | >0mM |
| 一価カチオン濃度 | 0～20mM | 0～150mM |
| リン酸イオン濃度 | 0～10mM | 0～100mM |
推奨 反応 時間 (37℃、2 mM Mg²+、 pH 8.0)
| UltraNuclease 量 (最終濃度) | 反応時間 |
| 0.25U/mL | >10時間 |
| 2.5U/mL | >4時間 |
| 25U/mL | 30分 |
ノート：
健康と安全を確保するために、白衣や手袋などの必要な個人用保護具を着用してください。
